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回答有关基因工程的问题:(1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生粘性末端

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解决时间 2021-12-31 21:17
回答有关基因工程的问题:(1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生粘性末端,也可能产生______末端.若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生______(相同,不同)粘性末端的限制酶.(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是______.在用表达载体转化大肠杆菌时,常用______处理大肠杆菌,以利于表达载体进入:为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交,该杂交技术称为______.为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成______,常用抗原-抗体杂交技术.如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞,先要将目睹基因插入农杆菌Ti质粒的______中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的______上.
最佳答案
(1)用限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端,也可能产生平口末端.若要在限制酶基因工程中,往往采用同种限制酶切割目的基因和质粒以产生相同的黏性末端,再用DNA连接酶使其直接进行连接.
(2)RNA聚合酶识别和结合的部位是启动子.将目的基因导入微生物细胞时,常用Ca2+处理微生物细胞,使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞,以利于表达载体进入.为了检测目的基因是否转录出了mRNA,可采用分子杂交技术,即用放射性同位素标记的胰岛素基因作探针与mRNA杂交;了检测目的基因转录的mRNA是否翻译成蛋白质,可采抗原--抗体杂交技术.
(3)采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体DNA上.
故答案为:
(1)平   相同  
(2)提供RNA聚合酶特异性识别结合位点,驱动基因转录  Ca2+DNA-RNA分子杂交  胰岛素原(蛋白质)  
(3)T-DNA   染色体
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