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引物进行PCR扩增,反应体系为20微升,5x的buffer加了4微升,100微摩的一对引物应各加多

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解决时间 2021-03-26 15:21
引物进行PCR扩增,反应体系为20微升,5x的buffer加了4微升,100微摩的一对引物应各加多
最佳答案
第一次产物是不必要纯化的。之所以要做巢式,就是因为第一次的产物量很少或者扩增的条件不优化。属于一个优化实验条件的步骤。

你可以做一个系列稀释,比如你第二次飞反应体积是20微升,可以不稀释,直接加1微升第一次反应的产物。其他的管子可以进行系列稀释,根据结果再做调整。

最优条件有可能要反复几次才能得到追问我只想知道反应体系中应该加多少引物,为什么?
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