微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节。图为大肠杆菌分离和培养过程中部分操作示意图。请分析回答下列问题：（1）实验过程中对培养基、培养皿、实验操作者的双手所采用的灭

微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节。图为大肠杆菌分离和
培养过程中部分操作示意图。请分析回答下列问题：

（1）实验过程中对培养基、培养皿、实验操作者的双手所采用的灭菌、消毒方法依次是 、　 、　 。
（2）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是　 。
（3）图示是利用　 法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步　 分散到培养基的表面。在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因是　 。
（4）关于图示的操作方法和结果，叙述正确的是　 。A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌。B．划线操作须在火焰上进行。C．在5区域中才可以提到所需菌落。D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌。（5）若要培养具有耐高和耐酸特性的酵母菌，制备选择培养基时在基本培养的基础上，注意　 和　 ，其目的是　 。

(答案→) 解析：（1）无菌操作技术有消毒和灭菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。（2）略；（3）接种有平板划线法和稀释平板法，本题是后者，反复把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，可以实现对菌种的分离，在操作过程中灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因是以免接种环温度太高杀死菌种；（4）在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌主要是稀释作用；（5）选择培养基的考查，根据菌种的特殊性制定培养基，使其他菌群不能在此生长，达到选择的目的。

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