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western blot电泳时内参上样量怎么确定

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解决时间 2021-04-09 11:26
western blot电泳时内参上样量怎么确定
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内参一般情况下的定义是正常样品中本来就有的相对更为稳定存在分子。
  所以,你做好实验的“阳性对照”、“阴性对照”,然后保持与“试验处理样品”同样的样品上样量,再然后对pvdf膜进行剪切以及分别的抗体(内参抗体、目标蛋白的特异性抗体)孵育就可以很放心地做后续分析了。
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内参一般是指待测样品中含有的一个表达水平稳定的蛋白质,而不是与待测样品相区分的另外一种样品。楼主所说的内参是否与其他的什么概念混淆了?如果给更具体的信息,我可以继续回答。 marker上样量同两个因素有关,一个是产品本身的浓度,这方面不需要知道确切的浓度,只需要看厂商的推荐用量即可;另一个是胶的性质,包括大小,厚度,浓度。如果楼主不愿研究得太细,只想试试看试出来就好了,建议尝试3-5ul每孔,然后看结果酌情调整。
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