重组picz 质粒 怎么进行菌落pcr验证

重组picz 质粒 怎么进行菌落pcr验证

菌落PCR的话与宿主细胞有关，像大肠杆菌细胞壁为革兰氏阴性，高温加热就会使菌体裂解，质粒逸出。

菌落PCR加样操作与普通PCR类似，只有模板由质粒替换为菌落，操作的时候注意不要挑到琼脂糖，琼脂糖会对PCR反应有影响，菌落量的话一般是挑半个菌落，以便PCR结束后，保存阳性对照。

菌落PCR程序也与普通程序一样，只是预变形时间延长为10min，以使宿主细胞充分裂解。