RT-PCR中总出现弥散条带，又不是退火温度问题，怎么办？
答案:3 悬赏:0 手机版
解决时间 2021-03-08 16:18
- 提问者网友：孤凫
- 2021-03-08 05:37
RT-PCR中总出现弥散条带，又不是退火温度问题，怎么办？
最佳答案
- 五星知识达人网友：煞尾
- 2021-03-08 06:05
我以前做实验也碰到过这样的情况，结果原因是引物过期了，加水稀释好的引物过了一年后再使用就可能出现条带弥散的情况，有没有可能是你的引物合成时间太久了降解了？
全部回答
- 1楼网友：春色三分
- 2021-03-08 07:08
会不会是胶的问题啊？
- 2楼网友：大漠
- 2021-03-08 06:39
上下引物的 tm最好相似，不能差异太大，不然不好设计退火温度；
内参条带很亮,说明rt应该没多大问题，问题可能出现在pcr上。
没有目的基因是因为
1 该基因确实不表达；
2 你的引物不特意，到ncbi的primerblast 看看；
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