利用基因工程技术,可以使目的基因上特定的碱基发生替换,从而产生定向变异以获得性能更优异的蛋白质，其基本过程如图所示，请回答冋题：(1)参照PCR技术,可用方法使质粒DNA双链解开，

利用基因工程技术,可以使目的基因上特定的碱基发生替换,从而产生定向变异以获得性能更优异的蛋白质，其基本过程如图所示，请回答冋题：

(1)参照PCR技术,可用 方法使质粒DNA双链解开，甲过程中加人的一定长度的核苷酸链，其中一个位置碱基C替代了碱基A,其它的序列与目的基因的一条链互补，该多核苷酸链在质粒DNA复制中作为 。
(2)乙过程是表示在DNA聚合酶作用下DNA 链延伸，要形成闭合环状DNA分子，还需要 酶的参与。
(3) 丙和丁过程表示质粒分别导入目的细胞，进行增殖并 ，多代繁殖后,能指导突变蛋白质产生的质粒占总数的 。加热 引物

(答案→)加热 引物 解析：PCR即聚合酶链式反应，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。是一项DNA体外合成放大技术，能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。根据题意和图示分析可知：可用加热方法使质粒DNA双链解开；该多核苷酸链作为特定引物起作用。要形成闭合环状DNA分子，还需要DNA连接酶的参与，将两个脱氧核苷酸之间连接成磷酸二酯键。由于图示转录和翻译过程，说明质粒DNA已经在目的细胞中表达，由于DNA分子是双链结构，一条链发生基因突变，所以通过丙过程后，突变的质粒：正常的质粒=1：1，因此，多代繁殖后,能指导突变蛋白质产生的质粒占总数的1/2。

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