简述柱层析的一般操作步骤？

简述柱层析的一般操作步骤？

参考答案: 装柱、上样、平衡、洗脱、收集、柱再生。 （1）样品的选择与预处理。 （2）装柱。将层析柱垂直固定，一般是先在柱内装入约1/3高度的水或缓冲液排走空气。要求柱子装的均匀，不分层，无气泡。 （3）平衡。用3-5倍柱床体积的起始缓冲液走柱，使介质充分平衡，柱床稳定。 （4）上样（加样）。打开层析柱下端出口，使缓冲液流出至刚好达到柱面。沿柱壁缓慢加入样品，打开下端出口，使样品溶液流出至刚好达到柱面，再取少量起始缓冲液洗涤柱壁。加样时应尽量减少柱面的搅动。 （5）洗脱与收集。打开起始缓冲液阀门，连续洗脱。用自动部分收集器自动或手动收集，合并同一高峰各管。流速不宜过快且要稳定，洗脱液的成分也不应改变（凝胶溶胀程度），整个洗脱过程中始终保持一定的操作压，可以用水或缓冲液作洗脱液。 （6）再生与保存。用原始平衡液进行充分洗涤，即可重复使用。
试题难度：★★☆
参考解析： 暂无解析

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