科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答：(1)①过程获得

科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答：

(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增，该技术必须用 酶，所需的原料是 。
(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点如表：
限制酶
BamHⅠ
HindⅢ
EcoRⅠ
SmaⅠ
识别序列
及切割位点
G↓GATCC
CCTAGG↑
AA↓GCTT
TTCGAA↑
GA↓ATTC
CTTAAG↑
CCCG↓GG
GGGC↑CC
用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ酶切割，原因是 。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用 酶对外源DNA、质粒进行切割。
(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的 、 过程。
(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是
。耐热的DNA聚合 四种脱氧核苷酸

我暂时保留我的看法！

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