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基因有两个剪接体,蛋白也有2条带吗

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解决时间 2021-03-16 11:54
基因有两个剪接体,蛋白也有2条带吗
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第一个问题:要看你的个人需要和方向了,根据不同的要求选择不同扩增方式,首先如果你扩增原核生物基因,那就是要的基因DNA序列的ORF区,从ATG到TAA,因为原核基因一般没有内含子,只需从基因组中扩即可;如果你要克隆表达真核基因,那么就要提取RNA,逆转录成cDNA之后设计引物扩增全CDS区,当然如果你要研究整个基因的mRNA的话,也可以用3‘或5’-RACEkit拉全长,这个难度稍高一点,如果只是要比较该基因的相对表达量,用定量PCR的话,只需针对该mRNA序列合适位置设计100-250bp长度的引物即可,一般位于CDS区,引物尽量在相邻exon接缝处。第二个问题:运用DNAMAN寻找保守序列,首先搜索各变体序列,分别在DNAMAN建立的‘newsequence’文档中命名保存,然后点击‘序列’工具栏中-比对-多序列比对选项,在对话框中选择‘文件’,选择之前保存的待比对序列文件,-打开,确定‘DNA’比对选项-点击下一步-对话框内选择比对方式(根据不同需要,一般选择,完全比对,快速比对,如果是测序结果也可以选择双链比对)-之后点击下一步(参数一般默认)-一直到出现比对结果,就可以看到保守序列位置了。
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