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PCR检验室中如何检查dNTP有没有DNase和RNase污染

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解决时间 2021-12-03 10:40
PCR检验室中如何检查dNTP有没有DNase和RNase污染
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1 配一个PCR体系,用作阳性对照,确定有条带产生;
2 用未知dNTP代替阳性体系中的dNTP,进行pcr反应,看是否会出现条带;
3 将未知dntp进行加热反应(若有酶,会使酶变性),再替代阳性体系中的dntp,进行PCR反应
全部回答
做阳性和阴性对照看看dNTP是否影响PCR扩增。
挨个检验各个组分有无酶或核酸污染在实践中效率很低,所以拿到试剂盒后尽快在一个干净的实验台将各个组分(10Xbuffer、dNTP、primer)以及水等分装,实验中如发现可能存在污染就将用过的试剂丢弃。现在的PCR试剂盒很便宜,分装后更便宜,这样可提高效率,而不用花时间纠结
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