尽可能避免两个引物分子之间3'端有较多碱基互补是什么意思

答案:2 悬赏:40 手机版

解决时间 2021-01-22 18:36

提问者网友：我的未来我做主
2021-01-22 07:51

最佳答案

五星知识达人网友：渊鱼
2021-01-22 09:09

设计引物应遵循以下原则：　　①引物长度：15-30bp，常用为20bp左右。　　②引物扩增跨度：以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。　　③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。　　④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。　　⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。　　⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。　　⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

全部回答

1楼网友：孤老序
2021-01-22 10:00

如果引物的碱基互补了，那么两种碱基会结合，形成一段小dna链，失效了引物是引起解旋的dna与之配对，形成两条新的dna链，从而达到dna的复制

我要举报

如以上问答信息为低俗、色情、不良、暴力、侵权、涉及违法等信息，可以点下面链接进行举报！