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哪位大神帮忙做下这个题目“设计抗除草剂转基因黄豆的研究方案”?

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解决时间 2021-08-17 17:09
哪位大神帮忙做下这个题目“设计抗除草剂转基因黄豆的研究方案”?
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首先:获得抗除草剂基因
这个基因目前比较普遍,一般很多载体上都有,你如果觉得不好,或者想自己发明一种新的抗除草剂基因亦可以自己调取
其次:将获得的抗除草剂基因连接到植物表达载体中!
选择合适的双子叶植物表达载体,如pBI121等,其多克隆位点前启动子为35s等双子叶植物强启动子,设计合适的酶切位点,构建用于在大豆中表达的植物表达载体!
之后:将重组载体转入黄豆中
大豆的转基因技术比较成熟,从农杆菌转化法到基因枪法以及PEG法等等.以最常规的农杆菌转化法为例,首先需要一套完整的大豆外殖体培养繁殖体系,能使得从受伤的叶片,产生愈伤组织,分化出不定芽,分化出根,炼苗,移植,生长成成熟植株.其次,需要合适的农杆菌,例如EHA105,将重组载体转入农杆菌感受态中.最后,建立合适的农杆菌转化体系,可能需要特殊的激素,以及辅助的小分子物质等,这方面的文章海了去了!
最后:转基因植株的鉴定
一般表达载体上会带有自己的表达标签,因此用载体上的标记,如Kan或者GUS作为标记,再看看能够抗除草剂,如果这两者都是阳性的那么一般来说就转基因成功了,具体的分子生物学鉴定是:1:Southern检测,2:RT-PCR检测,3:T3代纯系检测!
PS:如果有特殊用途,还需要田间释放试验和小鼠病理学实验,证明你的转基因大豆的生物安全性!
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