求各位生物学的高手赐教，关于高保真酶PCR扩增为什么都扩不出条带，用普通酶很容易就扩出来了。
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解决时间 2021-03-20 06:46
- 提问者网友：我们很暧昧
- 2021-03-19 23:35
求各位生物学的高手赐教，关于高保真酶PCR扩增为什么都扩不出条带，用普通酶很容易就扩出来了。
最佳答案
- 五星知识达人网友：躲不过心动
- 2021-03-19 23:41
很正常的现象，高保真酶出错率比taq酶低很多，代价就是对条件的要求非常苛刻，不容易P出来，但是P出来的基本上都不会出错。追问这个我也知道，但是换了很多条件，都还是P不出来。请问你有具体的改进措施不？？追答1.降低退火温度试试；
2.国产试剂质量不行，试试Takara公司的；
3.既然用Taq做出来了，试着往下做吧，如果目标片段不是特别长总能挑出没有变异的吧。追问我用的就是TAKARA公司的高保真酶，也做了梯度PCR，结果啥都没出。目的片段只有1100左右的长度。真心是搞不懂高保真酶。。。还是谢谢你啦
2.国产试剂质量不行，试试Takara公司的；
3.既然用Taq做出来了，试着往下做吧，如果目标片段不是特别长总能挑出没有变异的吧。追问我用的就是TAKARA公司的高保真酶，也做了梯度PCR，结果啥都没出。目的片段只有1100左右的长度。真心是搞不懂高保真酶。。。还是谢谢你啦
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