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western blot孵育一抗的时候可以同时孵育多个一抗么?

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解决时间 2021-01-06 08:05
western blot孵育一抗的时候可以同时孵育多个一抗么?
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理论上来说是可以的,网上也看到有网友声称自己这样做过。但是不同种一抗是否兼容不相互影响,各自应该加多少量这些条件都需要特别摸索优化。优化过程本身,包括了分别单独做每个一抗,确认在不受干扰条件下该抗体在特定样本中得到的条带究竟在什么位置,有哪些背景。
所以除非这个实验1.对楼主来说是要大量进行,重复进行的,摸清条件就可以大规模应用了;或者2.楼主样本太过珍惜,得到的量无法做足够多个western blot实验,必须在一张膜上得到尽可能多抗体的结果,否则算上优化用的精力和费用,一般不值得做。
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如果你的一抗都很特异的话,是可以的。而且最好都是同一种溶液配的,比如都是牛奶或者BSA
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