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用于基因克隆的大肠杆菌有没有生物安全危险?

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解决时间 2021-02-14 12:54
用于基因克隆的大肠杆菌有没有生物安全危险?
最佳答案
扩增出基因,构建载体,转入大肠杆菌表达,sds-page
全部回答
一个外源基因能不能表达,表达的产物蛋白有没有生物活性,关键不在乎基因的种类,而在于整体载体的设计——是否有适合宿主菌表达的启动子?如果你用牛的启动子在e.coli里表达,那必然会失望;是否有合适目的蛋白折叠的环境?如果温度掌握不好,或者诱导时机不对,也会造成表达出来的蛋白错误折叠,进而没有活性,另外,你的蛋白分离纯化手段也直接影响到蛋白的活性。当然,现在多采取变性表达---体外复性的方法获得蛋白活性,但是有一定技术难度,需要摸索。 总之,你提的问题不会有肯定的答案,这和你的载体设计,发酵手段,蛋白纯化手段都储甫臂晃赚浩辫彤播廓有很大关系。 一楼说的完全不靠谱,我做了多年外源蛋白表达工作,你的这个顾虑,是无数研究生无法顺利毕业的最重要原因之一,绝对不是那么简单的。
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