【质粒提取试剂盒】Axygenmini-prepare质粒提取试剂盒中的BufferS1S2...
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解决时间 2021-01-24 19:18
- 提问者网友：轻浮
- 2021-01-24 14:51
【质粒提取试剂盒】Axygenmini-prepare质粒提取试剂盒中的BufferS1S2...
最佳答案
- 五星知识达人网友：轻熟杀无赦
- 2021-01-24 15:47
【答案】 这是人家公司保密的东西,要内部人才会知道.不过根据其原理,应该可以推测出各溶液大致的组分吧（当然具体的浓度有些公司会优化,而略不同于分子克隆）.
S1：溶菌的buffer,无外乎提供缓冲条件的25mM tris-cl,螯合二价离子的10mM EDTA（抑制降解核酸的酶活）,更利于细菌悬浮的50mM葡萄糖；
S2:0.2 N NaOH & 1% SDS（裂解细胞,变性蛋白和DNA）；
S3：5M 醋酸钾（结合SDS,沉淀蛋白和基因组DNA）,2M冰醋酸（中和S2的碱,使质粒DNA复性）；
W1：去蛋白液（一般是含异丙醇（可能50%）和sds等去污剂的水溶液）
W2:70-75%乙醇,洗涤除盐（可能含有一些螯合盐的螯合剂?）
S1：溶菌的buffer,无外乎提供缓冲条件的25mM tris-cl,螯合二价离子的10mM EDTA（抑制降解核酸的酶活）,更利于细菌悬浮的50mM葡萄糖；
S2:0.2 N NaOH & 1% SDS（裂解细胞,变性蛋白和DNA）；
S3：5M 醋酸钾（结合SDS,沉淀蛋白和基因组DNA）,2M冰醋酸（中和S2的碱,使质粒DNA复性）；
W1：去蛋白液（一般是含异丙醇（可能50%）和sds等去污剂的水溶液）
W2:70-75%乙醇,洗涤除盐（可能含有一些螯合盐的螯合剂?）
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- 1楼网友：逃夭
- 2021-01-24 15:53
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