在组织培养中,外植体褐化的原因是什么?

在组织培养中,外植体褐化的原因是什么?

原因主要分为两类：非酶促褐变--非酶促褐变是由于细胞受胁迫或其他不利条件影响所造成的细胞程序化死亡或自然发生的细胞死亡,即坏死形成的褐变现象,并不涉及酚类物质的产生.诸多不利条件都可以造成细胞的程序化死亡,但这种褐变若采取适当措施或者愈伤组织适应了胁迫环境就不再发生.酶促褐变--多数认为,植物组织培养中的褐化现象主要是由酶促褐变引起的,即由多酚氧化酶作用于天然底物酚类物质而引起的.在正常条件下,细胞中的酚和醌之间保持一种动态平衡,醌类物质水平较低;而酚氧化酶及其底物分布在正常组织的不同部位,酚类物质分布在细胞的液泡内,酶则分布在各种质体或细胞质内,这种区域性分布致使底物与酶被质膜分隔开来;但当外植体或培养材料处于机械损伤等逆境,或细胞受伤或衰老时,细胞膜结构或细胞中物质区域化分布的破坏会导致酚氧化酶释放或合成,如果此时在合适的p H 和温度等条件下,酚氧化酶、酚类(底物) 和氧发生酶促氧化反应,形成有毒的棕褐色醌类物质,从而使组织发生褐变.此外,组织的老化或病变也可激活酚氧化酶而引起褐变.一般认为,褐化是指外植体或培养材料接种后在组织培养过程中,由于切割造成机械损伤,伤口处分泌出酚类化合物,在有氧的条件下,切面细胞中的酚类物质为多酚氧化酶催化,氧化为醌,醌再通过非酶促反应产生有色物质而导致组织褐变,变成棕褐色或暗褐色,并逐渐扩散到培养基中,抑制细胞内其它酶的活性,影响细胞的正常代谢,毒害整个组织,甚至导致组织死亡.尤其是木本植物组织的外植体褐变死亡是其培养难度较大的主要因素======以下答案可供参考======供参考答案1:病毒感染或者细菌、真菌侵染。供参考答案2:呵呵 外植体褐化的原因可以有很多，现在比较清楚的1、被细菌感染，当然这个在3天，至多一周肯定可以看到细菌或真菌了2、植物被切开的伤口，由于其应激性，会分泌大量的此生代谢产物，比如生物碱之类的，那么这类生物碱同样可以导致植物外植体褐化。3、培养基营养不足，无法促使植物外植体正常的生长，长时间以后导致植物体褐化。一般而言，外植体褐化，上述第2种情况居多，如果1周后你没有发现培养基张菌，那么90%以上是由于第2中情况。解决的方法，可以在培养基内，添加，pvc或者活性炭。他们对此生代谢物有吸附作用，主要就是用来抑制褐化的。如果没有该材料还可以 通过暗培养，来解决。一般接种以后，先暗培养2-3天，再接受光照，可以有效减少褐化率。才5分，呵呵 希望以上内容对你有所帮助。供参考答案3:通常是营养不良供参考答案4:掺入了杂菌,菌种不纯

谢谢回答！！！