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【琼脂】什么是双层琼脂培养法?培养细胞时是什么样?

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解决时间 2021-01-27 18:24
【琼脂】什么是双层琼脂培养法?培养细胞时是什么样?
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【答案】 用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的操作技能
  原理:噬菌体的效价即1mL样品中所含侵染性噬菌体的粒子数.效价的测定一般采用双层琼脂平板法.由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上,一般一个噬菌体产生一个噬菌斑,故可根据一定体积的噬菌体培养液所出现的噬菌斑数,计算出噬菌体的效价.此法所形成的噬菌斑的形态、大小较一致,且清晰度高,故计数比较准确,因而被广泛应用.
  方法:双层琼脂平板法
  1 倒下层琼脂
  融化下层培养基,倒平板(约10mL/皿)待用.
  2 倒上层琼脂
  融化上层培养基,待融化的上层培养基冷却至50℃左右时,每管中加入敏感指示菌 (大肠杆菌) 菌液0.2mL,待检样品液或上述噬菌体增殖液0.0.5mL,混合后立即倒入上层平板铺平.
  3 恒温培养
  30℃恒温培养6~12h观察结果.
  4 观察结果
  如有噬菌体,则在双层培养基的上层出现透亮无菌圆形空斑——¬¬¬¬噬菌斑
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对的,就是这个意思
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