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pcr用10ul体系可以pcr出来但是换50ul体系后pcr没有结果是因为什么

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解决时间 2021-02-25 09:21
pcr用10ul体系可以pcr出来但是换50ul体系后pcr没有结果是因为什么
最佳答案
PCR完了以后不能直接加酶切体系去做酶切。整个体系的离子浓度都不对的。这么切不切碎才怪。老老实实的PCR跑胶回收,或者PCR过柱回收再作酶切。变暗是因为体系不对都被切碎了星号反应。 另外PCR体系请扩大一下,25ul做克隆太少了。至少50ul。进行PCR反应试验的时候,其各种物质的含量是以终浓度来表示,即你所加入物质的量除以整个反应物总体积,只要终浓度不变,试验结果是不会变的,也就是你产物的浓度时不会变的。只不过是你的PCR产物量减半了,如果你用来进行克隆的话就要注...
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①所有试剂没混匀
②操作有问题,再试一次
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