用6孔板培养细胞后怎么做western blot，麻烦说明详细步骤，谢谢！
答案:2 悬赏:40 手机版
解决时间 2021-02-10 23:10
- 提问者网友：王者佥
- 2021-02-10 00:32
谢谢
最佳答案
- 五星知识达人网友：天凉才是好个秋
- 2021-02-10 01:49
去除培养基，加PBS清洗一或两遍，吸尽PBS尽量不留一滴，在冰上以每孔0.1ml加入裂解液，吹打使与细胞完全接触， 12000转/min，离心5分钟，取上清液。-20 ℃贮存。然后测浓度、上样。
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- 1楼网友：举杯邀酒敬孤独
- 2021-02-10 02:32
做western blot需要多少细胞并不是一个固定的值 这主要取决于蛋白的表达量，没有一个绝对的量 如果做细胞总蛋白的话，至少10的4次方细胞每微升蛋白裂解液。一般可以每泳道取10的5次方细胞每微升蛋白裂解液（即10微升上样） 根据这个数量级，结合western blot结果进行调整即可确认做western blot需要多少细胞
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