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用茚三酮法测蛋白水解度应该怎样做?步骤和计算公式?标准曲线已经做出来了,可是要按哪一个公式计算?

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解决时间 2021-02-14 14:55
用茚三酮法测蛋白水解度应该怎样做?步骤和计算公式?标准曲线已经做出来了,可是要按哪一个公式计算?
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你看一下别人的文章,很具体了.======以下答案可供参考======供参考答案1:如果已做完标线,可以按下列公式进行计算: 注意:将图片放大,看得更清晰。公式中DH即为产物水解度(Degree of hydrolysis,DH), 用于衡量蛋白质的水解程度,定义为蛋白质水解过程中被裂解的肽键数h(mmol/g蛋白质)与给定蛋白质的总肽键数hhot (mmol/g蛋白质)。 补充: 1. 7.8 mmol/g是给定蛋白质即大豆蛋白质的总肽键数,以hhot(hot为h的右下标)表示。 2. 操作与计算: (1)标准曲线的绘制 (因已做完,故略去) (2)水解蛋白液中-NH2基的测定(茚三酮法):取水解蛋白液0.50 mL定容至50 mL,取0.40 mL稀释液于试管中并加入1.60 mL蒸馏水、1.00 mL显色剂,混匀后置沸水浴中加热15 min,同时作空白试验。以后操作同标准曲线。利用标准曲线计算水解蛋白液-NH2的含量(μmol/mL)。 (3)水解蛋白液中蛋白质含量的测定:取1.00 mL水解液进行湿法消化处理,然后在蒸馏仪上蒸馏进行人工滴定定氮,蛋白质的含量表示为N×6.25 mg/mL。 (4)结果计算:原料蛋白质中存在游离的-NH2基,在计算时要考虑它的影响,否则计算的DH值偏大。 用茚三酮法测蛋白水解度应该怎样做?步骤和计算公式?标准曲线已经做出来了,可是要按哪一个公式计算?(图1)答案网 www.Zqnf.com 答案网 www.Zqnf.com
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