PCR反应体系50uL改25uL

PCR反应体系50uL改25uL

不会。进行PCR反应试验的时候，其各种物质的含量是以终浓度来表示，即你所加入物质的量除以整个反应物总体积，只要终浓度不变，试验结果是不会变的，也就是你产物的浓度时不会变的。只不过是你的PCR产物量减半了，如果你用来进行克隆的话就要注意够不够。
还有，你说的循环数，循环数没有一个固定的标准，是根据你的试验要定。一般32—37个循环足够，因为在PCR后期循环中，随着taq酶以及各种离子的减少，不足以提供PCR的量，从而影响反应。建议你在做你这个试验的时候，可以看看文献，看看别人所用的试验体系。从而确定你的PCR反应程序。

机器程序不用改，你的40个循环已经够多了，再加多循环扩增效率也不高。产物浓度基本不会变，但产物总量会少。

PCR仪程序体系设定那里要改成25微升体系，循环数不变，最后得到的产物浓度原则上没有改变

1,视PCR仪而定，老式的不用改程序，某些新PCR仪会根据体系调温度，这种情况下要在机器上改一下；
2，循环数不用改变；
3，产物浓度理论上不变；