我用同样的方法和试剂表达两种蛋白，一种成功了，另一种镍柱变成灰褐色，应该是镍掉了，为什么啊？

我用同样的方法和试剂表达两种蛋白，一种成功了，另一种镍柱变成灰褐色，应该是镍掉了，为什么啊？

Ni离子是重金属，进入蛋白中肯定是有影响的，如果这个蛋白是用于人体或者动植物的肯定是不行的。Ni柱重新挂Ni确实是必须要脱Ni的，但一般是先用咪唑把蛋白全部洗下来后才脱Ni的，所以一般不太可能进入蛋白溶液中，如果进入了你可以重新用另一根柱子（这个柱子得保证结合你的蛋白），将蛋白溶液穿过这个柱子，让蛋白结合至柱子上，而Ni则和流穿液一起流穿，在把蛋白洗脱下来即可；至于透析，没试过，不好说，但Ni毕竟是离子，小分子，应该能透析掉的啊。希望我的回答对你有帮助。