做流式细胞时候,制备细胞悬液加入荧光染料后,还要做什么处理么?
收集的荧光会不会包含有来自未结合于抗原的抗体?就是说会不会有游离的抗体,且激光激发标记于游离抗体上的荧光素?
做流式细胞时候,制备细胞悬液加入荧光染料后,还要做什么处理么?
答案:1 悬赏:30 手机版
解决时间 2021-05-24 03:01
- 提问者网友：遁入空寂
- 2021-05-23 18:49
最佳答案
- 五星知识达人网友：轻雾山林
- 2021-05-23 20:18
染色后要洗细胞,将细胞洗干净,这步非常关键.游离的带荧光标记的抗体会附着在溶液的杂质中,还有细胞碎片上,所以不管你怎么洗,肯定还会有游离的抗体,但是如果做的好的话,少到可以忽略不计.针对你提出的问题,有两点是必须要做到的：1.最后一步洗细胞要洗干净；2.要做阴性对照（作为本底的数值）,即选一组不会和抗体发生特异结合反应的细胞,按照实验组一样做对照,加荧光抗体.在计算结果时候,用你的实验组的数值减去这个阴性对照组（空白、本底）的数值,就是最终的值了.有不明白可以再问
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