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一个挑3个单克隆测序,测序结果有个别碱基变化怎么办

答案:2  悬赏:40  手机版
解决时间 2021-03-08 01:24
一个挑3个单克隆测序,测序结果有个别碱基变化怎么办
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这个要看你的测序数据来源 因为不管是sanger还是NGS测序 其实都是PCR的过程 会或多或少的引入人为的突变 当然也有可能是发生了部分的突变 建议你根据目的来选择测序方法 还有碱基的差异 你要查看一下ORF 看下是否造成了氨基酸的改变 改变了以后还要看是否造成蛋白空间结构的改变
1、测序反应开始及最后都不是很稳定,表现在测序结果上就是如此了。 2、SNP在测序结果上的表现是该位点处为双峰。因为其他地方序列都是一样的,末端终止得到的片段也就是完全一样的,只有在SNP位点处才会得到两种片段。
全部回答
1.多送测几个克隆,如果测的结果跟这次一致,那么没必要重新扩增了。 2.如果必须要得到理想中的序列,那就需要做突变修复。 测序一般每个反应开始都不准确,首先排除这个因素。同意楼上的同时送几个测序进行比较,用高保真的酶再做一次,修复突变比较麻烦。
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