为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于

为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”）
（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。
（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术，该技术的核心是 和 。
（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 做探针进行分子杂交检测，又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。a （1分） a（1分）

(答案→)a （1分） a（1分） 解析：（1）根据题意和图示分析可知：a处为磷酸二酯键，b处为氢键。限制酶：主要从原核生物中分离纯化出来。特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。所以限制性内切酶作用于图中的a处，DNA连接酶作用于a处。（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用植物组织培养，利用植物细胞的全能性，通过脱分化形成愈伤组织，再通过再分化形成新的植株。（4）要确定耐盐转基因水稻是否培育成功，从分子水平上，需要用放射性同位素标记的目的基因做探针进行分子杂交检测；从个体水平上，又要用一定浓度的盐水浇灌方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

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