请问想问下在以cDNA为模板时，PCR的结果却是徒步 什么原因

请问想问下在以cDNA为模板时，PCR的结果却是徒步 什么原因

我的模板质粒非常异常，超螺旋的部分亮度太亮了。引物有一个也是用了好久的。
我最近做拼接PCR也是弥散带，把所有的东西都换了一遍，锁定引物和模版。我的模板质粒非常异常，超螺旋的部分亮度太亮了。引物有一个也是用了好久的。
我最近做拼接PCR也是弥散带，把所有的东西都换了一遍，锁定引物和模版。我的模板质粒非常异常，超螺旋的部分亮度太亮了。引物有一个也是用了好久的。
我以前P侧翼序列时。经常P出弥散带，就是真实PCR的反映。结果优化后能P出单一条带也是单引物自扩结果。
如果你一定要优化条件，可以用TOUCH DOWN。 就是退火逐步降低。我的经验是能筛到单一条带。但不保证是你要的目的条带。churchill87426(站内联系TA)LZ 的目的条带多长啊？其实内标很好并不能说明cDNA好啊，我这段时间做的用国产试剂盒反转录就能出actin但是目的条带不出（目的条带2100bp）,后来换个进口反转录试剂盒，一次目的条带就出了，当然actin也出。 不知道LZ最后P出来目的条带没啊？