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当使用限制酶来获取目的基因时是否一定要用同种限制酶切割DNA和质粒来获取目的基因

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解决时间 2021-07-24 21:35
当使用限制酶来获取目的基因时是否一定要用同种限制酶切割DNA和质粒来获取目的基因
最佳答案

一般情况下是的,因为只有这样才能有相同的黏性末端,目的基因和运载体才能重组.但也有两种不同的内切酶产生相同的黏性末端如G↓ATTCG 和↓ATTC.
还有一种可能是,因为运载体上的基因表达是由方向的(即启动子和终止子的位置),而目的基因的两端末端相同,那么就有可能使目的基因反向接在运载体上,这就可以用双酶切解决,即目的基因和运载体都用相同的两种内切酶,这就可以使目的基因与运载体定向连接了,如:
--↓------↓--(运载体) ̄ ̄↓ ̄ ̄ ̄ ̄ ̄ ̄↓ ̄ ̄(目的基因)
酶1 酶2 酶1 酶2
很抱歉,我只能画出这样的图列,希望能看明白.


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