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CHO-K1和CHO有什么不同

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解决时间 2021-04-05 05:19
CHO-K1和CHO有什么不同
最佳答案
【CHO】
1957年美国科罗拉多大学Dr. Theodore T. Puck从一成年雌性仓鼠卵巢分离获得,为上皮贴壁型细胞,是生物工程上广泛使用的细胞系。
该细胞具有不死性,可以传代百代以上,是生物工程上广泛使用的细胞。另外CH0细胞在基因工程使用中还有一个优点,该细胞属于成纤维细胞(fibroblast),是一种非分泌型细胞,它本身很少分泌CHO内源蛋白,因此对目标蛋白分离纯化工作十分有利。可形成有活性的二聚体(如白介素2),具有糖基化的功能(如EPO),CHO为表达复杂生物大分子的理想宿主。
由于该细胞存在遗传缺陷,无脯氨酸合成基因,不能将谷氨酸转变为谷氨酸--半醛,培养过程中需在培养基中添加L-脯氨酸才能生长。并且由于该细胞已经霍乱毒素适应,形态学有所改变。最初细胞为贴壁型细胞,经多次传代筛选后,也可悬浮生长。
工业生产上应用较多的是CHO-K1细胞,为转化细胞系,细胞染色体分布频率是2n=22,系亚二倍体细胞。ATCC保存CHO-K1细胞株,编号为CCL-61,被广泛地用于重组DNA蛋白的表达。

【特性】CHO细胞虽可像微生物细胞一样,在人工控制条件的生物反应器中进行大规模培养,但其细胞结构和培养特性与微生物细胞相比,有显著差别: 动物细胞比微生物细胞大得多,无细胞壁,机械强度低,对剪切力敏感,适应环境能力差;倍增时间长,生长缓慢,易受微生物污染,培养时须用抗生素;培养过程需氧量少(氧传质系数kLa 大于10 h-1即可满足每毫升107 个细胞的生长);培养过程中细胞相互粘连以集群形式存在;原代培养细胞一般繁殖50 代即退化死亡;代谢产物具有生物活性,生产成本高,但附加值也高。

【CHO-K1细胞】是由上海拜力生物科技有限公司代理的atcc品牌细胞。体外培养的细胞可视为一类在特定条件下生长的细胞群体,它们保持着与体内细胞相同的基本结构和功能,以及对相应理化和生物因素刺激的应答反应,此类细胞对研究人类相关组织器官的生物学性状及相关疾病的发生机制等起到重要的促进作用,供体外实验使用。
CHO-K1细胞接种与培养
CHO-K1细胞,进行细胞计数后,将细胞以3*106个/ml的密度接种于培养瓶内常规培养,逐日观察细胞的生长情况。一般于培养次日可见细胞贴壁生长,更换培养液,弃去未贴壁的细胞及细胞碎片。以后每隔2~3天更换培养液1次(每次换液50%).
CHO-K1细胞培养注意要点1、严格无菌操作2、最初接种的培养瓶应尽量小些,而接种的细胞数应尽量多些。
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