反转录中 RNA 和 引物的量

在用promega的MMLV做反转时，加OLIGO DT18时，说明书说每微克RNA加0.5微克OLIGO DT，我用了2ugRNA需要加 1ug的 oligo dt 18，但是我的oligo是TAKARA公司的，它的规格是50微摩尔/升的.我该怎么换算？你们平时做的时候，RNA的量和引物的量是什么比例？ 谢谢帮助

takara的试剂盒里推荐的使用量是每20ul体系使用total RNA1ug，浓度为2.5uM的oligo dt 1ul。同时还可以加入随机引物或者下游特异性引物，可以提高反转录效果。

随机引物其序列为部分随机或全部随机排列，属于非特异性引物，与模板rna中许多序列通过错配而复性。对于mrna的随机引物一般是部分随机，利用poly(a)设计一个锚定引物，然后逆转录酶的作用下即可进行cdna第一链扩增。