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测多酚氧化酶适用的波长范围是多少

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解决时间 2021-01-20 01:24
测多酚氧化酶适用的波长范围是多少
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试剂:1.PH7.6磷酸盐缓冲液:取0.2mol﹒L-1磷酸二氢钠(NaH2PO4﹒H2O13.9g用蒸馏水定容至500ml)13.0ml,再取0.2mol﹒L-1磷酸氢二钠(Na2HPO4﹒7H2O26.825g用蒸馏水定容至500 ml)87.0ml,混合上述两种溶液即可。
2.0.2mol邻苯二酚溶液
操作步骤:1.粗酶液的提取:称取样品2g,加PH7.6磷酸盐缓冲液10ml,在研钵中冰浴研磨成匀浆转入离心管, 10000rpm离心10min,取其上清液即为粗酶液。2.多酚氧化酶活性测定:取两只光径25px的比色杯,于一只中加入PH7.6磷酸盐缓冲液1ml,0.2mol邻苯二酚溶液1ml,作为校零对照。另一只加入PH7.6磷酸盐缓冲液1ml,0.2mol邻苯二酚溶液1ml,上述酶液0.5ml,用紫外可见光光度计在波长410nm条件下测定OD值,每10s记录一次OD值(测8-12次)。
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