如何证明两个蛋白之间清楚的机制
答案:2 悬赏:30 手机版
解决时间 2021-03-14 18:52
- 提问者网友：人生佛魔见
- 2021-03-14 03:47
如何证明两个蛋白之间清楚的机制
最佳答案
- 五星知识达人网友：有你哪都是故乡
- 2021-03-14 03:53
如果是内源性的AB那就可以。
1 分段过表达A或者B，看看哪段是相互结合必需的
2 尝试在大肠杆菌表达纯化相互结合必需的那段多肽，或者全蛋白，作体外结合试验，有条件的话，测定 Kd
3 从结构上阐明两者相互作用，核磁或者晶体结构。做不做这一步要根据蛋白质重要性，结构的新颖性，及其他的蛋白质生物化学实验数据综合判断。
除了以上，应该还有很多别的试验手段来验证，总之精确而复杂度高的实验最后考虑。
1 分段过表达A或者B，看看哪段是相互结合必需的
2 尝试在大肠杆菌表达纯化相互结合必需的那段多肽，或者全蛋白，作体外结合试验，有条件的话，测定 Kd
3 从结构上阐明两者相互作用，核磁或者晶体结构。做不做这一步要根据蛋白质重要性，结构的新颖性，及其他的蛋白质生物化学实验数据综合判断。
除了以上，应该还有很多别的试验手段来验证，总之精确而复杂度高的实验最后考虑。
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- 1楼网友：煞尾
- 2021-03-14 05:02
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