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(10分)研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效

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解决时间 2021-01-27 10:41
(10分)研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段。

(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中 (填“低表达”或“高表达”)。H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如图12所示。制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建  区基因,转入原核细胞表达并提纯。
(2)将H蛋白注射到小鼠体内,取该小鼠的脾脏细胞与  细胞进行融合,使用的化学诱导剂是  ,细胞融合的原理是  。
(3)将融合细胞在  培养基中培养,一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,应用  技术进行抗体阳性检测。经多次筛选,就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。
(4)将筛选得到的杂交瘤细胞,经过  或小鼠腹腔内培养,获取大量的单克隆抗体。
(5)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”,杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体  的特点。
最佳答案
(答案→) 解析:⑴根据题意可知,原癌基因的表达产物H蛋白在正常组织中 低表达;根据H蛋白的结构图可知,若用H蛋白制备抗原需要利用胞外区基因 ⑵在制备单克隆抗体过程中,需要将脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合,诱导其融合的试剂为聚乙二醇,其融合的原理是借助于细胞膜的流动性 ⑶将融合细胞接种在选择培养基中,从中选出杂交瘤细胞,利用抗原—抗体杂交技术最后选出产生单克隆抗体的杂交瘤细胞 ⑷将杂交瘤细胞经过体外培养或小鼠腹腔内培养,获得大量的单克隆抗体 ⑸单克隆抗体的优点是特异性强,灵敏度高
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