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怎样确定ROS来源于线粒体

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解决时间 2021-03-09 02:23
怎样确定ROS来源于线粒体
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那你就拿药抑制电子传递链啊,四个复合物还像是1和3产ros(你再查查看,我记不准了)。四个复合物分别有抑制剂,鱼藤酮什么的。
ROS来源可以通过线粒体特殊阻滞剂,然后还有通过ROS与线粒体是否共定位来判断。
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活性氧检测试剂盒是利用荧光探针dcfh-da进行活性氧检测的。dcfh-da本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成dcfh。而dcfh不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的dcfh生成有荧光的dcf。检测dcf的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。活性氧检测试剂盒。 荧光法检测线粒体产生和释放的反应性氧化物(ros)[10]。羟基自由基的检测(二羟苄胺dhbas和水杨酸盐salicylate)[11] ros was evaluated by the staining of 2’,7’- dichlorofluorescein diacetate(二氯荧光乙酰乙酸盐).ros production was detected by nitroblue tetrazolium (nbt,硝基四氮唑蓝)assay。 目前,对于细胞线粒体产生的ros 测定,所发展的方法有(荧光标记后)激光扫描共聚焦显微术(takahashi et al.,2002)和荧光探剂dcfda标记后的荧光分光光度法(esposti ,2002)等,本实验以lucigenin 或luminol 为探剂,用化学发光技术,对从正常大鼠肝细胞及心肌细胞分离的线粒体的metc 电子漏进行了测定
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