如何 看泛素化降解的westen blot的图

如何 看泛素化降解的westen blot的图

蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。

一是主要看你的抗体检测的泛素化是什么样的，是特定位点的，还是普适性的。 二是需要了解泛素化降解后，是会出现泛素化信号减少，还是就彻底没有了，想清楚这两点，基本实验结果就明确了。 当然，既然看的是降解，实验中一定要包含一个未降解的样品作为对照，进行平行试验，才能方便用于观察降解发生后的变化。 如果是针对普适性位点的，检测到wb图应该是smear的，整个泳道里面可能都有信号，如果部分泛素化降解后，检测不到了，那么信号降低，或者开始有条带可见，在保证与对照样品量一致的条件下，应该是信号减弱或某特定位置信号消失。 如果是特定位置的泛素化，那么降解后，有可能泛素化抗体再也检测不到任何信号了，也能说明问题。