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一般引物长度为18~30碱基,这里的长度指的P+、P-总长度吗,还是分开的,包不包括保护碱基和酶切位点的长度

答案:2  悬赏:70  手机版
解决时间 2021-01-27 03:39
一般引物长度为18~30碱基,这里的长度指的是上、下游序列(P+和P-)的总长度吗,P+和P-的Tm值不同,退火温度该怎么计算?根据以下图片显示引物长度和Tm值分别是多少?
最佳答案
不是,是单指上游,下游,即上下游均为18-30个碱基,上下游的Tm值最好不要相差大于5.一般在合成引物后在合成单上有一个Tm值,可在其基础上做一个梯度PCR,从而确定最佳的Tm值。
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