（14分）生长因子通常是指具有刺激细胞生长的多肽类物质，主要通过与细胞膜上特异性的受体结合，来调节细胞生长及相关的功能。请根据以下提供的实验材料与用具，来研究内皮生长因子（VEGF

（14分）生长因子通常是指具有刺激细胞生长的多肽类物质，主要通过与细胞膜上特异性的受体结合，来调节细胞生长及相关的功能。请根据以下提供的实验材料与用具，来研究内皮生长因子（VEGF）和胎盘生长因子（PIGF）对小鼠干细胞分化的影响，完成以下问题。
实验原理：
VEGF和PIGF均能促进干细胞生长，干细胞分化后细胞内 会明显增加，可用 判断干细胞是否分化。
实验材料：
怀孕的小鼠，干细胞培养液、VEGF试剂、PIGF试剂、生理盐水、细胞培养瓶、检测试剂盒、CO2培养箱等。（要求与说明：答题时不考虑加入试剂后的体积变化等误差。）
实验思路：
（1）在 条件下，取出小鼠胚胎的肝脏，用机械法剪碎至1mm3大小的组织块，再用适当的方法获得干细胞悬浮液。
（2）取动物细胞培养瓶，平均分成若干组，并标号，每组设置若干个重复，每个培养瓶 。
（3） 。
（4）在 中培养一段时间后，用试剂盒检测培养液中Akt蛋白含量，统计并分析所得数据。
预测结果：请用柱形图表示支持VEGF试剂和PIGF试剂能共同促进小鼠干细胞分化的实验结果。Akt蛋白含量 试剂盒检测Akt蛋白含量
（1）无菌 （2）加入适量且等量的干细胞培养液
（3）A组：培养液中加适量干细胞悬浮液；B组：培养液中加等量干细胞悬浮液+VEGF；C组：培养液中加等量干细胞悬浮液+PIGF；D组：培养液中加等量干细胞悬浮液+VEGF+VEGF （4）CO2培养箱
预测结果：请用柱形图表示支持VEGF试剂和PIGF试剂能共同促进小鼠干细胞分化的实验结果。
（画在下框内）

(答案→)Akt蛋白含量 试剂盒检测Akt蛋白含量（1）无菌 （2）加入适量且等量的干细胞培养液（3）A组：培养液中加适量干细胞悬浮液；B组：培养液中加等量干细胞悬浮液+VEGF；C组：培养液中加等量干细胞悬浮液+PIGF；D组：培养液中加等量干细胞悬浮液+VEGF+VEGF （4）CO2培养箱 预测结果：请用柱形图表示支持VEGF试剂和PIGF试剂能共同促进小鼠干细胞分化的实验结果。（画在下框内） 解析：试题分析：实验原理：在实验思路中提出“培养一段时间后，用试剂盒检测培养液中Akt蛋白含量”，故推测干细胞分化后细胞内Akt蛋白含量会增加，可用试剂盒检测Akt蛋白含量判断干细胞是否分化。⑴动物细胞培养时，需在无菌条件下进行。⑵本实验的目的是看不同条件下小鼠干细胞分化情况，应在培养瓶中加入适量且等量的干细胞培养液。⑶本实验为研究内皮生长因子（VEGF）和胎盘生长因子（PIGF）对小鼠干细胞分化的影响，故单一变量应是内皮生长因子（VEGF）和胎盘生长因子（PIGF）的不同。即A组：培养液中加适量干细胞悬浮液；B组：培养液中加等量干细胞悬浮液+VEGF；C组：培养液中加等量干细胞悬浮液+PIGF；D组：培养液中加等量干细胞悬浮液+VEGF+VEGF。⑷把处理不同的各组细胞放在CO2培养箱进行培养，然后观察细胞生长分化的情况。预测结果：因实验原理中指出“VEGF和PIGF均能促进干细胞生长”，且在预测结果中提出“支持VEGF试剂和PIGF试剂能共同促进小鼠干细胞分化”故小鼠干细胞分化的分化程度依次是A<B=C<D，具体图解见答案。考点：本题考查动物细胞培养的相关实验，意在考查考生具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。

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