如何把外周血中的树突状细胞分离，纯化出来

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解决时间 2021-03-09 06:59

提问者网友：抽煙菂渘情少年
2021-03-09 03:21

最佳答案

五星知识达人网友：愁杀梦里人
2021-03-09 04:21

目前用Ficoll密度梯度离直接离纯化外周血单核细胞
:
　　1.　短管加入适量淋巴细胞离液
　　2.　取肝素抗凝静脉血与等量Hank's液或RPMI1640充混匀用滴管沿管壁缓慢叠加于层液面注意保持清楚界面水平离2000rpm×20钟
　　3.　离管内三层层血浆Hank's液层主要红细胞粒细胞层淋巴细胞离液、层界面处单核细胞主白色云雾层狭窄带(图)单核细胞包括淋巴细胞单核细胞外含血板

　　4.　用毛细血管插云雾层吸取单核细胞置入另短管加入5倍体积Hank's液或RPMI16401500rpm×10钟洗涤细胞两
　　5.　末离弃清加入含10％牛血清RPMI1640重悬细胞取滴细胞悬液与滴0.2％台盼兰染液混合于血球计数板计数四格内细胞总数
　　单核细胞浓度(细胞数／1毫升细胞悬液)＝
　　　　　　　　　4格内细胞总数
　　　　　　　　　──────────　×　104×2(稀释倍数)
　　　　　　　　　　　　　　4
　　6.　细胞力检测：死细胞染兰色细胞着色计数200淋巴细胞计算细胞百率
　　　　　　　　　　　　　细胞数
　　　　　细胞百率＝──────　×100％
　　　　　　　　　　　　　总细胞数
　　用本离PBMC纯度90％收获率达80～90％细胞百率95％

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1楼网友：罪歌
2021-03-09 04:48

任务占坑

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