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qPCR实验中紫外线照射可以防止DNA污染吗

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解决时间 2021-02-03 00:01
我开题的时候老师说紫外线只有在体外才会导致DNA损伤,在体外对DNA 没有影响,我查了下资料没找到具体文献支持上述结论,请各位大侠帮忙解答一下
最佳答案
紫外线主要是通过对微生物(细菌、病毒、芽孢等病原体)
的辐射损伤和破坏核酸的功能使微生物致死,从而达到消毒的目的。紫外线对核酸的作用可导致键和链的断裂、股间交联和形成光化产物等,从而改变了DNA的生物活性,使微生物自身不能复制,这种紫外线损伤也是致死性损伤。所以要防止DNA对qPCR的污染,除了是去除环境微生物,另外要注意1、气溶胶;2.实验过程中各种耗材对待测样本的接触污染。
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。。。。体外会有损伤,体内没有影响吗?体内没有影响是因为体内有损伤修复机制。 再看看别人怎么说的。
不可以防止污染,即使是对DNA复制有损伤,但它不会区分DNA和cDNA,PCR过程中DNA有引物结合位点的话还是会扩增DNA的。
主要是在于体内DNA复制的纠错机制,体内DNA复制的出错比体外小多了。 紫外线对DNA的损伤,我记得主要是在T上, 受紫外线照射而损伤的DNA照样可以作为体外PCR模板使用,而在体内则不成。 你说的防止qPCR的污染是不是指qPCR产物在打开管盖后产生的气溶胶(因为这种PCR产物比较小,容易产生气溶胶),会污染下一次的实验!因而用紫外线照射,以减少这种污染? 个人在实验中也遇到过这种污染,紫外线照射的效果不明显,换空间比较合适!还有你的qPCR产物最好别开盖子。
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