下图为转基因抗病香蕉的培育 过程流程图，其中质粒上的Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请据图回答下列问题：（1）形成重组质粒A

下图为转基因抗病香蕉的培育 过程流程图，其中质粒上的Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请据图回答下列问题：

（1）形成重组质粒A时，应选用限制酶__ _ _，对 _ 　 进行切割。
（2）一个质粒被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同时切割后可得到　 　 　 个DNA片段，
　 个黏性末端。
（3）培养基中的 氨苄青霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使重组质粒A中含有　 基因。
（4）要培养既抗病又无病毒的香蕉植株，应将农杆菌导入　 细胞中。再进行植物的组织培养。
（5）以上获得转基因抗病香蕉植株的过程中，所用到的原理有　 。

(答案→) 解析：（1）形成重组质粒时应含目的基因时，而Sma I，切割目的基因时会破坏目的基因，所以选Pst I和EcoRI，对目的基因切割，不会对目的基因造成破坏，所以使用者两种限制酶切割目的基因和质粒。（2）质粒被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同时切割，会被分割成三段， EcoR I、Pst l切割质粒形成的是黏末端，每种酶切割质粒会形成两个黏性末端，总的会产生4个黏性末端， Sma I形成的是平末端，所以三种限制酶切割质粒会形成四个黏性末端。（3）培养基中的 氨苄青霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，所以导入的重组质粒中要含氨苄青霉素抗性基因，才能在含氨苄青霉素的培养基是生长。（4）要培养无病毒的香蕉植株，一般选用植物的根茎芽尖端，因为植物根茎芽尖生长快，无病毒，在这样的植物根茎芽尖细胞中导入含目的基因的农杆菌后，可培养既抗病又无病毒的香蕉植株。（5）结合题目可知培养转基因抗病毒香蕉使用所用的原理有基因过程中的基因重组，及植物细胞工程中的植物细胞全能性。

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