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双酶切buffer量加多了能出结果吗?

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解决时间 2021-11-30 20:11
双酶切buffer量加多了能出结果吗?
最佳答案
多多少?
会稀释引物和酶追问多了一倍,想加5微升,加了10微升。追答现在结果如何呢?
嗯嗯,算一下,如果是10×的buffer的话,原计划切50μ,回收,现在只多加了5μ
理论上是不会有影响的~
祝成功(*^__^*)
全部回答
没啥大问题
这个要看你的酶对离子强度的敏感性如何,如果非常敏感,加一倍的量,会使酶的活性下降很多,你应当查一下你的酶在不同的离子强度下的活性,所有的公司都会有数据的,他们至少会提供0, 50,100mmol/L三种离子强度下酶的活性程度,如果发现高一级浓度的那个活性在50%或者以上,就没有问题,但如果低于20%,那就有问题了。两者之间,那就猜吧。
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