荧光染料定量PCR熔解曲线Tm值过高对结果有什么影响
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解决时间 2021-02-16 05:05
- 提问者网友：那叫心脏的地方装的都是你
- 2021-02-15 16:02
荧光染料定量PCR熔解曲线Tm值过高对结果有什么影响
最佳答案
- 五星知识达人网友：大漠
- 2021-02-15 17:17
用Syber Green方法做完PCR后，用来判断产物是否相对专一。反应结束后，逐渐加温。和Syber Green分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链，就不能在和Syber Green结合。一般每加温一度，读一次信号。当温度到达PCR产物的Tm时，产物解离一下增多。曲线的横坐标是温度，而纵坐标是荧光信号的变化！开始加热，信号变化不大，所以几乎是平的，接近Tm时，突然变化加大，所以出现峰值。再升温，产物全部解离，就又是一条直线了。
如果有非特异性产物，在加热过程中就会出现一些比较矮，宽的峰。
如果有非特异性产物，在加热过程中就会出现一些比较矮，宽的峰。
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- 1楼网友：独行浪子会拥风
- 2021-02-15 18:23
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