关于一段NCBI上没有的基因序列
答案:1 悬赏:40 手机版
解决时间 2021-11-07 04:26
- 提问者网友：龅牙恐龙妹
- 2021-11-06 21:58
关于一段NCBI上没有的基因序列
最佳答案
- 五星知识达人网友：duile
- 2021-11-06 23:01
提取该物质总RNA做反转录
获得cDNA后合成双链
根据同源物种的该基因序列设计引物（简并引物）
PCR扩增得到目的片段（可能会用到巢式PCR增加特异性）
切胶回收纯化
质粒载体连接转染
筛选获得重组子测序
得基因序列后根据此序列再次设计引物
做3’和5’RACE
再次测序确认得到全长基因
利用拟南芥突变体做该基因的功能分析
这是我一同学做的博士论文实验过程
做的是某一树种的基因同源克隆
获得cDNA后合成双链
根据同源物种的该基因序列设计引物（简并引物）
PCR扩增得到目的片段（可能会用到巢式PCR增加特异性）
切胶回收纯化
质粒载体连接转染
筛选获得重组子测序
得基因序列后根据此序列再次设计引物
做3’和5’RACE
再次测序确认得到全长基因
利用拟南芥突变体做该基因的功能分析
这是我一同学做的博士论文实验过程
做的是某一树种的基因同源克隆
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