基因克隆是对分离出来的目的基因进行大量扩增的过程。经过基因克隆，可以生产出大量的目的基因或在基因表达时获得大量的蛋白质。细菌质粒是基因克隆的合适载体，经研究发现，某些细菌质粒中含有

基因克隆是对分离出来的目的基因进行大量扩增的过程。经过基因克隆，可以生产出大量的目的基因或在基因表达时获得大量的蛋白质。细菌质粒是基因克隆的合适载体，经研究发现，某些细菌质粒中含有两个抗生素抗性基因——氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，而且，在四环素抗性基因中存在限制酶的单一识别序列。
下图表示利用质粒进行基因克隆的过程，其中A-D表示物质，I和II表示抗性基因，①—⑦表示过程，其它数字表示菌落，据图回答下列问题：

（1）写出下列字母和编号的名称：A： ； II： 。
（2）将A和B形成D所需的酶是 。⑤过程中为提高成功率，常用 溶液处理大肠杆菌。
（3）为筛选含有物质A的细菌，需进行细菌培养，先在培养基（一）中只加入氨苄青霉素，一段时间后，培养基上长出的细菌菌落具有 特性。然后，用灭菌绒布从培养基（一）中蘸取菌种，再按到只含四环素的培养基（二）中培养。根据培养基（一）和（二）上的细菌生长情况，可以判断图中菌落 （填数字）即为筛选出的含有物质A的细菌，原因是 。（1）目的基因 氨苄青霉素抗性基因
（2）限制酶和DNA连接酶 CaCl2
（3）抗氨苄青霉素 3、5 由于目的基因破坏了四环素抗性基因，使受体细胞不能在含有四环素的培养基上生长，所以该菌落就是筛选的含有目的基因的菌落（2分）

(答案→)（1）目的基因 氨苄青霉素抗性基因 （2）限制酶和DNA连接酶 CaCl2 （3）抗氨苄青霉素 3、5 由于目的基因破坏了四环素抗性基因，使受体细胞不能在含有四环素的培养基上生长，所以该菌落就是筛选的含有目的基因的菌落（2分） 解析：（1）如图A表示目的基因，由于在四环素抗性基因中存在限制酶的单一识别序列，所以II表示氨苄青霉素基因。（2）构建基因表达载体所需的酶有限制酶和DNA连接酶。为了使目的基因导入大肠杆菌，常用CaCl2处理大肠杆菌。（3）能够在氨苄青霉素的培养基中生长的细菌菌落能够抗氨苄青霉素，由于四环素抗性基因被限制酶破坏，所以含有物质A的细菌不能在四环素的培养基上生长，即3和5。

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