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T-DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植

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解决时间 2021-12-20 22:40
T-DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化.在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代).

(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除______,因为后者产生的______会抑制侧芽的生长.
(2)为筛选出已转化的个体,需将T1代播种在含______的培养基上生长,成熟后自交,收获种子(称为T2代).
(3)为筛选出具有抗盐性状的突变体,需将T2代播种在含______的培养基上,获得所需个体.
(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体.为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与______植株进行杂交,再自交______代后统计性状分离比.
(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失,从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性______.
(6)根据T-DNA的已知序列,利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段.其过程是:提取______植株的DNA,用限制酶处理后,再用______将获得的DNA片段连接成环(如图),以此为模板,从图中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取______作为引物进行扩增,得到的片段将用于获取该基因的全序列信息.
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