MS固体培养基的制作流程

MS固体培养基的制作流程

一、实验所需的仪器设备和用具。

二、实验安排与要求：将全班若干小组（6-7人），每小组配制500 mlMS固体培养基，

三、边示范边讲解实验方法和步骤

1、计算并填写培养基成分单

计算公式：∨母液＝∨配制÷母液倍数

∨激素＝∨配制×培养基中所要求的激素浓度÷激素母液浓度

2. 每组取500ml的烧杯一只，加300ml蒸馏水，用天平称4g琼脂放入蒸馏水中，在电炉上加热溶解。称15g蔗糖放入溶解的琼脂中。

3. 按配方取出各种母液，放入到溶解后的琼脂和蔗糖溶液中，用玻璃棒搅动混合，并加蒸馏水定容至500ml。

4. 用1mol/L的NaOH或1mol/LHCL将PH值调至5.8，可用PH精密试纸或酸度计测定。

5. 用培养基分装用具将500ml的培养基分注于15个所选用的培养瓶中。

6. 用封口膜、棉塞或其它封口物包扎瓶口，并做好标记。

7. 把分装好的培养基及所需灭菌的各种用具、蒸馏水等32313133353236313431303231363533e4b893e5b19e31333236393132，放入高压灭菌锅的消毒桶内，将外层锅内加水至水位线。盖好锅盖，上好螺丝，接通电源升温。待锅内温度达100。C（0.05kgf/cm2或0.005MPa）左右时，打开排气阀排净锅内冷空气，然后关闭排气阀，继续加热至温度达到121。C（1.05kgf/cm2或0.103MPa）时，维持20~30min即可切断电源，让锅内气压自然下降，当压力降到零点后，打开排气阀，排出剩余蒸汽，再打开锅盖取出培养基及灭菌物品。

8. 培养基及灭菌物品在室温下自然冷却后，存放于阴凉干燥洁净处待用。

四、总结高压蒸汽灭菌的原理和一般操作步骤实验

ms固体超强组合型制备工艺 详细说明： ivf等极为困难的特殊培养以及分子生物学实验专用 milli-q synthesis系结合gradient所采用的短波uv灯(185nm)以及biocel所采用的5,000分子量的uf膜，其产水的toc值可在5ppb以下(当进水的toc值低于50ppb)，热源则低于0.001eu/ml的新型超纯水装置。 本系统特别适用在容易受到水质影响的ivf或是dna、rna等分子生物学实验。当然，milli-q synthesis的产水也可使用在需高灵敏度的hplc检测上。 功能 ◆toc数值显示 ◆电阻率显示 ◆水温显示 ◆纯水柱更换显示 ◆“a10”uv灯更换显示 ◆uv灯更换提示 ◆uf膜自动清洗 ◆消毒提醒 ◆定期循环 ◆定量取水 ◆取水纯度设定 ◆运转状态输出 需加装“a10”toc检测仪 技术指标 产水量 1.5l/min 电阻率 18.2mω·cm(25℃) 总有机碳toc 〈5ppb 热源 0.001eu/ml 细菌 〈1cfu/ml 颗粒〉0.22um 〈1p/ml elix产水作为进水，其toc值低于50ppb millipore公司是驰名世界的纯水及超纯水设备制造商，根据用户的独特要求设计制造出一系列不同的纯水及超纯水系统。 其中milli-q系列更是所有从事化学分析、生化研究及细胞培养所不可缺少的，该系统以反渗透水、蒸馏水、elix水或去离子水为进水， 随时提供符合美国材料试验学会(astm)、美国病理学会(cap)和临床医学会(nccls)规定的i级(试剂级)超纯水。 a)纯化系统 将自来水作初步处理，一般包括预过滤（深层过滤及膜过滤）和反渗透或蒸馏法，而反渗透因其污染物去除率达到90%-95%以上，回收率达20%-40%以上，效益比传统纯蒸馏法更理想，因此是milli-q超纯水系统的理想进水。 另外，millipore为配合日渐普及的微量分析，研制出elix连续电流去离子系统，结合反渗透及连续电流去离子技术的优点——经济高效(r〉5mω·cm)，可用于一般实验室作分析用水，又因其出水质量高，如作为milli-q的进水，更能提高milli-q纯化柱的使用寿命及出水水质。 b)存储系统 纯化水在一般出水罐中储存会吸收环境中的杂质，使水质变坏。另外，光照也会引起微生物滋生种种杂质，并且微生物会严重影响下游的超纯系统。millipore专利设计的储水系统能有效改善以上问题，长期保持水质，提高milli-q水的质量。 c)超纯水系统 将纯水作超纯化处理，出水水质可以达到电阻率：18.2mω·cm，总有机物〈10ppb，配合不同设计的超纯化柱，能有效去除水中的热源及有机物，适合所有高灵敏度实验的要求。 此外，millipore的纯水及超纯水系统能外接打印机，打印出水水质资料，符合优良实验室标准(glp)，millipore产品更得到了iso9002质量认证，制造工艺符合gmp规范。 最新milli-q超纯水系统包括：milli-q academic/biocel/gradient/synthesis/element系列。独特设计的新一代增强型milli-q century超纯水系统可提供最高品质的超纯水： 根据进水水质不同和用途不同，可灵活选用不同的qg预纯化柱和qu超纯化柱 如果偶尔对热源或rna酶有要求，可选择pyrogard d一次性超滤柱 新的定时流量出水开关，可使取水做到定时或定量，而且流速校正简单快捷 采用pou(point of use)装置：伸展灵活的供水操作臂使采水操作更加方便；也可选择脚踏开关，远距离显示和取水装置，使取水和操作更加灵活方便 高精度的水质测量系统，精确测量产水的电阻率，并有toc测量可供选择(toc测量范围1-999ppb，符合usp24) 整机符合优良实验室标准(glp)，备有rs232输出接口，也可选择millipore最新的explore data 软件将自己的pc机与纯水系统相连，下载历史数据和水质报告，使实验室环境网络化 采用新型加压泵噪音更小，真正静音操作(1米处小于40db) 整机设计小巧即可挂墙又可在桌面上使用，也可选择分体式设计，最大程度的节约实验室空间 有最大的灵活组合性和升级性 不同的超纯水应用，对应于不同颜色的前门，改变实验室仪器单一色彩格调，增加一点轻松 以基础应用型milli-q academic型为基础，对于各种不同的应用领域和不同的技术分析目的要求，可增加或调整不同的水处理组件，组合成一系列的milli-q超纯水系统，满足不同实验室的不同分析要求 milli-q超纯水系统应用简介 milli-q academic 基础应用型 高效液相色谱 离子色谱 原子吸收光谱 原子发射光谱 质谱分析仪 氨基酸分析仪 pcr应用及分析 气象分析仪器 精密仪器分析用水等 高精密光学镜片冲洗 分析试剂及药品培置 milli-q biocel 超滤除热源型 分子生物学及生命科学 动物细胞及植物细胞培养 试管婴儿 电泳、凝胶分析 生物工程 培养基制备 milli-q gradient 超低有机物型 高效液相色谱 离子色谱 气相色谱 气-质联用 总有机碳(toc)分析 有机物分析 毛细管电泳 微电子部件的冲洗 毒理学研究 环保实验分析 langmuir单层分析 milli-q synthesis 超强组合型 环境分析实验 物理学、电化学及界面研究 毒理学研究 各种高精密仪器分析 精密分析标准品、试剂 分子生物学及生命科学 试管婴儿 组织培养 动物细胞及植物细胞培养 氨基酸分析 双向电泳 milli-q element 超低元素型 痕量分析，如icp-ms、ilc、faas等 规格 产水流速 1.5l/min 产水电阻率 18.2mω·cm(25℃) toc 〈10ppb& 〈5ppb& 热源 〈0.001eu/ml# 〈0.001eu/ml 〈0.001eu/ml# 〈0.001eu/ml 〈0.001eu/ml# 进水水质 elix、ro(反渗透)纯水、蒸馏水或去离子水 进水压力 零压力进水(〈0.3bar) 进水水温 5~35℃ 重量+ 16.6kg 16.9kg 17.4kg 17.7kg 19.9kg 机身大小 h455w255d315mm 电导仪 316l同轴式电极，电极常数为0.01cm-1 自动定量取水校正 定量取水时准确度为±3% 远距离诊断 可通过系统专用软件做远距离系统传输并由专业系统工程师做远距诊断 认证 全系统可检附并可追溯至nist的仪表校验证明书(iso9001/iso14001) :进水的toc值浆影响超纯水的最终toc值。上述的toc值是以elix产水作为进水，其toc值低于50ppb. & :甚至可降至1ppb以下。视进水条件及采样操作环境. #:需另加装pyrogard-d. +:此为加装a10 toc监测仪的重量. nist:national institute of standard and techology.