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酶切后产物可以做pcr产物回收么

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解决时间 2021-12-18 00:08
酶切后产物可以做pcr产物回收么
最佳答案
如果没有其他杂带就可以。单一条带的PCR产物,如果酶切后也只有一条带,就可以用产物回收试剂盒回收。但如果酶切后有杂带或多条带,就只能做胶回收。
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pcr产物经pcr纯化试剂盒纯化后,可以做ecori和bamhi的双酶切。酶切、纯化都可以用pcr纯化试剂盒完成,只有一种情况例外,pcr模板为质粒,且这个质粒和要用的载体有相同的抗性。此时需要跑一次胶来丢掉模板质粒,否则在连接产物转化的平板上长出的菌落许多是模板质粒,而不是你所构建的质粒。 pcr产物不经纯化也可以直接酶切,但也很麻烦,效果可能不会很好,可能需要添加其他东西(亚精胺,限制性内切酶缓冲液,bsa等)来完成酶切。
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