关于PMD-18载体及载体引物

答案:2 悬赏:50 手机版

解决时间 2021-03-28 21:52

提问者网友：
2021-03-28 07:56

在做蓝白斑筛选时，将目的片段与pMD18-T载体连接后转化到感受态细胞，再用载体引物扩增后的片段长度比之前的目的片段大多少？是怎么来的？谢谢！

最佳答案

五星知识达人网友：酒安江南
2020-12-16 17:31

一般是大小一致的，但是主要要看你的目的片段和引物有没有结合位点，要是有的话PCR的大小就不一定了！一般的载体引物都是扩多克隆位点之间的片段，不一样的引物的延伸长度不一定！最好的如果你的片段很大的话最好就是用自己的引物！建议加一步酶切验证,这样的话也可以双保险，如果酶切位点不好选择的话，可以用18Tsimple，然后PCR引物加你自己设计的酶切位点！

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1楼网友：不想翻身的咸鱼
2020-10-02 23:45

用这两种引物：bcabest sequencing primer m13-47和bcabest sequencing primer rv-m vector size (bp) 2692 cloning site 425 lacz α-peptide 146-475 ampicillin resistance gene 1632~2492 puc origin 873-1461 primer binding sites： bcabest sequencing primer m13-47 binding site 352-375 bcabest sequencing primer rv-m binding site 484-507

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