怎样筛选和鉴定无性系突变

怎样筛选和鉴定无性系突变

体细胞无性系变异：植物细胞、组织、器官在无菌条件下进行离体人工培 养，经过脱分化和再分化过程，重新形成愈伤组织和完整植株称为体细胞无性系（somaclones）。 在培养阶段发生变异，进而导致再生植株亦发生遗传 改变的现象(包括形态、生理生化、育性、抗性等方面)， 称为体细胞无性系变异（somaclonal variation）。
筛选：
（一）诱导起始材料的选择
选择起始材料原则 目标性状的可行性试验植物、细胞培养、技术水平适当的、细胞类型
（二）自发突变
一般来讲，长期营养繁殖的植物、培养时间较长或继代次数多等，均容易出现较高的变异率。另外，培养类型中，原生质体、细胞、愈伤组织培养等所出现的变异频率要高于组织或器官培养的变异
（三）诱变
常用的化学诱变剂： -烷化剂如DES，可改变DNA结构而引起突变；- 碱基类似物，核酸复制时，可掺入到新 合成的DNA分子中引起错配；- 移码诱变剂，如ICR化合物转座子插入诱变
（四） 转座子插入诱变
是近年来利用分子生物学技术发展起来的新的体细胞诱变方法。转座子既可直接将外源基因带入细胞内获得新性状，又可以独立插入通过其转座功能诱导变异。
（五）目前，使用较多的转座子体系是玉米的Ac/Ds系统。
首先采用基因转化的方法将Ac/Ds导入受体细胞，再通过体细胞培养或再生植株的自交或测交使Ac因子切除，由于转座子插入的随机性，即可在切除Ac的植株中筛选出不同变异。利用这一途径已在苜蓿、马铃薯、番茄、甘蓝等多种植物上获得可利用的体细胞变异植株。
鉴定：
（1）初步鉴定：细胞学和分子生物学鉴定 （2）植株进行抗性测定和遗传分析